Chiens :
* Dame : Un beau Cocker Spaniel de race pure qui est choyé et aimé par ses propriétaires.
* Tramp : Un cabot streetwise et débraillé qui se méfie au départ des humains mais se réchauffe progressivement avec Lady.
* Fiable : Un Bloodhound sage et loyal qui est le meilleur ami de Lady.
* Jock : Un Terrier écossais arrogant et énergique qui est l'autre ami de Lady.
* Buster : Un Bull Terrier grincheux et territorial qui est l'ami de Jock.
* Cheville : Un Pékinois doux et impertinent qui se lie d'amitié avec Lady alors qu'elle est seule.
* Taureau : Un Bulldog coriace et exigeant qui est le petit ami de Peg.
* Chats siamois : Deux chats siamois espiègles qui sont une source constante d'ennuis pour Lady.
Les humains :
* Cher Jim : Le propriétaire aimant de Lady.
* Chéri : Le propriétaire aimant de Lady.
* Tante Sarah : Jim Dear et la tante de Darling qui viennent lui rendre visite et lui amènent son petit terrier ennuyeux et gâté, "le bébé".
* Le livreur : Un homme sympathique qui accouche du bébé.
Autres animaux :
* Boris : Un vieux matou grincheux qui vit avec Peg et Bull.
* Le Rat : Un gros rat que Tramp combat dans la ruelle.
* Le cheval : Le cheval qui tire le chariot pendant la scène des spaghettis.
Cette liste comprend les personnages principaux, mais il existe également plusieurs personnages mineurs qui apparaissent tout au long du film.