Le Globe était construit principalement en bois et mesurait environ 100 pieds (30 m) de diamètre. Il avait un toit de chaume et pouvait accueillir environ 3 000 spectateurs. La scène était située à une extrémité du théâtre et projetée dans la cour, permettant une relation étroite et intime entre les acteurs et le public. La cour, ou fosse, était l'endroit où se tenait la plupart du public, tandis que les clients les plus riches étaient assis dans les galeries entourant la scène.
Le Théâtre du Globe n'était pas seulement utilisé pour des productions théâtrales, mais aussi pour d'autres types de divertissement, comme les combats d'ours et les jeux d'épée. C'était un lieu populaire auprès du public londonien et les pièces de Shakespeare y connaissaient un succès particulier. Cependant, le Globe a également été la cible de critiques et de controverses, en raison de son association avec les jeux de hasard, la prostitution et d'autres activités moins savoureuses.
En 1613, le Théâtre du Globe fut détruit par un incendie lors d'une représentation de la pièce Henry VIII de Shakespeare. Le théâtre a été reconstruit en 1614 mais a été fermé par les puritains en 1642. Il a finalement été démoli en 1644.
Le Globe Theatre moderne, situé à proximité du site d'origine à Southwark, est une reconstruction du théâtre d'origine et est utilisé pour les représentations publiques des pièces de Shakespeare.