Dame Macbeth : L'épouse de Macbeth et co-conspiratrice. C'est une femme impitoyable et ambitieuse qui pousse Macbeth à tuer le roi Duncan. Après le meurtre, Lady Macbeth est en proie à la culpabilité et aux remords et finit par mourir dans un état de folie.
Roi Duncan : Le roi d'Écosse au début de la pièce. C'est un dirigeant gentil et bienveillant, et son assassinat par Macbeth déclenche les événements tragiques de l'histoire.
Banquo : Un collègue général et ami proche de Macbeth. Il soupçonne l'implication de Macbeth dans le meurtre du roi Duncan et finit par devenir victime de la paranoïa de Macbeth.
Les Trois Sorcières : Trois personnages surnaturels qui prophétisent que Macbeth deviendra roi. Leurs prophéties déclenchent les événements de la pièce et sont utilisées comme symbole du destin et des conséquences de l'ambition.
Macduff : Un noble écossais qui s'oppose au règne de Macbeth et finit par diriger les forces qui le renversent.
Malcolm et Donalbain : Les fils du roi Duncan. Malcolm s'enfuit en Angleterre après le meurtre de son père et retourne finalement en Écosse pour diriger une armée contre Macbeth. Donalbain fuit également l'Écosse après le meurtre mais ne joue pas de rôle significatif dans le reste de la pièce.
Hécate : La déesse de la sorcellerie et de la magie. Elle apparaît dans l'acte III de la pièce et ordonne aux sorcières d'exécuter ses ordres.