* Le Bouffon Vert (Norman Osborn) :C'est le méchant principal et il est jouable dès le début.
* Nouveau gobelin (Harry Osborn) :Vous débloquez Harry en tant que personnage jouable en terminant le mode histoire du jeu.
Il n'y a pas d'autres gobelins jouables dans le jeu.
Il est important de noter que Spider-Man 3 (2007) est un jeu solo . Il n'existe pas de modes multijoueurs permettant de débloquer de nouveaux personnages.